產(chǎn)品組成
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規(guī)格
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濃度
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儲存
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HS Taq DNA Polymerase
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250U
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2.5U/μl
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-20℃
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10×HS Taq PCR Buffer
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1 ml
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10×
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5×GC-rich buffer
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0.5ml
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5×
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dNTPs
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0.1 ml
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10 mM
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一、產(chǎn)品說明
HS Taq DNA Polymerase 是來源于 Thermu aquaticus DNA Polymerase 基因,經(jīng) DNA shuffling 篩選,獲得的突變體,適用于熱啟動 PCR。該酶在室溫或 37℃,酶活性被抑制,從而抑制低溫條件下引起的非特異性退火或引物二聚體引起的非特異性擴(kuò)增,而高溫(68℃以上)酶活性被激活。突變重組的大腸桿菌經(jīng)誘導(dǎo)表達(dá)后,經(jīng)兩次柱純化分離得來,純度高。擴(kuò)增 PCR 產(chǎn)物 3'端帶有“A”堿基,可直接用于 T-A 克隆。
二、活性定義
在 72℃,30 分鐘內(nèi)將 10 nmol 同位素標(biāo)記的全核苷酸摻入到 DE81 脂不溶物質(zhì)中所需的酶量為 1 個活性單位。
三、用途
? 熱啟動 PCR,提高擴(kuò)增特異性。
四、特點(diǎn)
? ①快速的 PCR 擴(kuò)增,40s/1kb。
? ②高效的 PCR 擴(kuò)增,通過熱啟動 PCR,提高了 PCR 的性能,實現(xiàn)了高特異性的 PCR 反應(yīng)。
? ③優(yōu)良的耐熱性,對處理 GC-rich 模板等具有特異性高級結(jié)構(gòu)的目的片段非常有利。
? ④室溫放置 2 月,能保持良好擴(kuò)增能力。
五、PCR 性能
? ①以 Lambda DNA 為模板,可以很好地擴(kuò)增 8kb 的 DNA 片段。
? ②以人的基因組 DNA 為模板,可以很好地擴(kuò)增 2.3 kb 的片段。
六、10×HS Taq PCR buffer
200mM Tris-HCl (pH8.8) 100mM KCl 20mM MgCl2 100mM(NH4)2SO4 Stabilizers
七、Storage buffer
50 mM Tris-HCl(pH 8.0) 100 mM KCl 1 mM DTT 0.1 mM EDTA Stabilizers 50% glycerol
包裝中帶有一支 5×GC-rich buffer(產(chǎn)品編號:GC-001),適合 GC 含量高的模板擴(kuò)增。如用普通 buffer擴(kuò)增效果不好,模板 GC 含量高的,可在原有 buffer 體系中補(bǔ)加 5×GC-rich buffer(50μl 體系,加 5-10μl)。